Ген резистенције на карбапенем (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Назив производа
Комплет за детекцију HWTS-OT045 гена резистенције на карбапенем (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (флуоресцентна PCR)
Епидемиологија
Карбапенемски антибиотици су атипични β-лактамски антибиотици са најширим антибактеријским спектром и најјачом антибактеријском активношћу. Због своје стабилности на β-лактамазе и ниске токсичности, постао је један од најважнијих антибактеријских лекова за лечење тешких бактеријских инфекција. Карбапенеми су веома стабилни на плазмид-посредоване β-лактамазе проширеног спектра (ESBL), хромозоме и плазмид-посредоване цефалоспориназе (AmpC ензими).
Канал
| ПЦР-мешавина 1 | ПЦР-мешавина 2 | |
| ФАМ | Имп | ВИМ |
| VIC/HEX | Интерна контрола | Интерна контрола |
| CY5 | НДМ | КПК |
| РОКС | OXA48
| OXA23 |
Технички параметри
| Складиштење | ≤-18℃ |
| Рок трајања | 12 месеци |
| Тип узорка | Спутум, чисте колоније, ректални брис |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Локалитет одговора | 103CFU/mL |
| Специфичност | а) Комплет детектује стандардизоване негативне референце компаније, а резултати испуњавају захтеве одговарајућих референци. б) Резултати теста унакрсне реактивности показују да овај комплет нема унакрсну реакцију са другим респираторним патогенима, као што су Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, респираторни аденовирус, Enterococcus, или узорци који садрже друге гене отпорне на лекове CTX, mecA, SME, SHV, TEM итд. ц) Анти-интерференција: Муцин, Миноциклин, Гентамицин, Клиндамицин, Имипенем, Цефоперазон, Меропенем, Ципрофлоксацин хидрохлорид, Левофлоксацин, Клавуланска киселина, Рокситромицин су одабрани за тест интерференције, а резултати показују да горе поменуте супстанце које интерферирају немају интерферирајућу реакцију на детекцију гена отпорности на карбапенем KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM и IMP. |
| Применљиви инструменти | Applied Biosystems 7500 системи за ПЦР у реалном времену QuantStudio®5 системи за ПЦР у реалном времену SLAN-96P PCR системи у реалном времену (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 систем за ПЦР у реалном времену LineGene 9600 Plus систем за детекцију ПЦР у реалном времену (FQD-96A，ХангџоуБиоер технологија) MA-6000 квантитативни термални циклер у реалном времену (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 систем за ПЦР у реалном времену BioRad CFX Opus 96 систем за ПЦР у реалном времену |
Ток рада
Опција 1.
Препоручени реагенс за екстракцију: Макро и микро-тест општи ДНК/РНК комплет (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (који се може користити са Макро и Микро-Тест аутоматским екстрактором нуклеинских киселина (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) компаније Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Додати 200 μL нормалног физиолошког раствора у талог талуса. Накнадни кораци треба да прате упутства за екстракцију, а препоручена запремина елуирања је100μL.
Опција 2.
Препоручени реагенс за екстракцију: Реагенс за екстракцију или пречишћавање нуклеинских киселина (YDP302) произвођача Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Екстракцију треба започети у строгом складу са кораком 2 упутства за употребу (додати 200 μL пуфера GA у талог талуса и мућкати док се талус потпуно не суспендује). За елуцију користити воду без RNase/DNase, а препоручена запремина елуције је 100 μL.
Опција 3.
Препоручени реагенс за екстракцију: Реагенс за ослобађање узорка за макро и микро-тест. Узорак спутума треба испрати додавањем 1 мл нормалног физиолошког раствора у горе поменути третирани талог талуса, центрифугирати на 13000 о/мин током 5 минута, а супернатант одбацити (сачувати 10-20 µL супернатанта). За чисту колонију и ректални брис, додати 50 μL реагенса за ослобађање узорка директно у горе поменути третирани талог талуса, а наредни кораци треба да се екстрахују према упутству за употребу.
