1 Позадина епидемије денге: Растући глобални изазов јавног здравља

Денга је акутна вирусна болест коју преносе комарци, а узрокује је вирус денге (DENV), који се појавио као најбрже ширећа арбовирусна болест на глобалном нивоу, представљајући значајну претњу по безбедност јавног здравља. Током протекле две деценије, глобална инциденца денге је драматично порасла, а број пријављених случајева се удвостручује годишње од 2021. године [1]. У децембру 2023. године, Светска здравствена организација (СЗО) је прогласила глобалну ванредну ситуацију због денге како би ојачала координисане међународне напоре у одговору. Епидемиолошке процене СЗО показују да је приближно 3,9 милијарди људи широм света у ризику од инфекције денгом, са процењених 390 милиона инфекција које се јављају годишње - од којих се 96 милиона јавља као клинички очигледни случајеви [1,2].

2 Епидемиолошки најважнији догађаји

Епидемиолошке карактеристике денге обликоване су интеракцијом вирусолошких фактора, екологије вектора, имуног одговора домаћина и социо-еколошких услова. Свеобухватно разумевање ових карактеристика је неопходно за развој ефикасних стратегија превенције и контроле, као и прецизних дијагностичких приступа.

2.1 Вектори преноса и обрасци преноса у урбаним срединама

Вирус денге се првенствено преноси путемAedes aegypti и Aedes albopictusкомарци. Међу овим врстама вектора, Aedes aegypti је препознат као најкритичнији вектор преноса, карактерисан високом „људском прилагодљивошћу“ и широком распрострањеношћу у тропским и суптропским урбаним срединама. За разлику од других комараца вектора арбовирусних патогена, Aedes aegypti показује следеће кључне епидемиолошке карактеристике:

-Склоност ка размножавању у антропогеним срединама (нпр. контејнери за складиштење воде, одбачене гуме)

-Јакан тропизам за људску крв као извор хранљивих материја

-Дневно понашање у исхрани

Ове особине дефинишу денгу као типичну„урбане заразне болести“,са ефикасношћу преноса значајно повећаном у густо насељеним подручјима. Студије СЗО су показале да у густо насељеним урбаним срединама, повећана учесталост контакта комараца и људи може значајно повећати основни репродуктивни број (R₀) DENV-а, чиме се убрзава ширење епидемија [2].

2.2 Глобални трендови ширења и покретачки фактори

Према извештајима СЗО, глобални број пријављених случајева денге је експоненцијално порастао у последње две деценије [1,3]. Овај растући тренд је првенствено вођен следећим међусобно повезаним факторима:

(1) Климатске промене: Растуће глобалне температуре не само да проширују географски распон погодних станишта за векторе комараца, већ и скраћују спољашњи период инкубације денга грознице унутар домаћина комараца, чиме се повећава ефикасност преноса. СЗО је потврдила варијације у густини комараца изазване климом као поуздан предиктор просторно-временске динамике епидемија денга грознице.

(2) Урбанизација: Брза и непланирана урбана експанзија створила је обилна станишта за размножавање вектора комараца, док је повећана густина насељености ојачала континуитет ланаца преноса DENV-а.

(3) Глобално кретање становништва: Међународна путовања и трговина олакшали су брз прекогранични пренос денга грознице, подстичући прелазак са увезених случајева на одрживи локални пренос. Подаци надзора СЗО показују да су између 2010. и 2021. године Сједињене Државе пријавиле 7.528 случајева денга грознице повезаних са путовањима, међу којима је 3.135 захтевало хоспитализацију, а 19 је резултирало смртним исходом.

(4) Ширење распрострањености вектора: Глобално, географски распон Aedes aegypti и Aedes albopictus наставља да се шири, а комарци Aedes се све више насељавају у деловима Европе. Сходно томе, денга је еволуирала од традиционално регионалне епидемије до глобалне претње јавном здрављу.

2.3 Коциркулација више серотипова и механизми реинфекције

Вирус денге обухвата четири антигенски различита серотипа (DENV-1 до DENV-4). Инфекција једним серотипом пружа дугорочни заштитни имунитет против тог специфичног серотипа, али само привремену и делимичну унакрсну заштиту против остала три серотипа. Општа популација је универзално подложна DENV-у, при чему само подгрупа заражених особа развија клиничку болест [2].

У ендемским регионима, више серотипова денге често коциркулише истовремено, што резултира могућношћу да појединци доживе вишеструке инфекције денге током свог живота. Епидемиолошке студије СЗО су идентификовале коциркулацију више серотипова као кључни покретач периодичних епидемија денге [1].

2.4 Секундарна инфекција и појачање зависно од антитела

Критичан и јединствен феномен у епидемиологији денге јепојачање зависно од антитела (ADE)Током секундарне инфекције хетерологним DENV серотипом, ненеутрализујућа антитела произведена током примарне инфекције олакшавају улазак вируса у моноците и макрофаге, чиме се побољшава репликација вируса. Овај механизам је широко препознат од стране СЗО као главни патогени фактор код тешке денге, укључујући хеморагичну денгу грозницу и синдром денге шока [1].

Епидемиолошки подаци СЗО доследно показују да особе са секундарном денга инфекцијом имају значајно већи ризик од развоја тешке болести у поређењу са онима са примарном инфекцијом – карактеристика која је од великог значаја за праћење болести и клиничко лечење. Важно је напоменути да, иако је ризик од тешке болести повећан током секундарне инфекције, инфекција било којим DENV серотипом може потенцијално напредовати до тешке денга грознице [1].

2.5 Неспецифичне клиничке манифестације и ризик од погрешне дијагнозе

Клиничке манифестације денге су приметно неспецифичне, посебно у раним фазама болести, често се преклапајући са манифестацијама других вирусних инфекција које преносе комарци (нпр. чикунгуња и Зика вируси), као и одређених респираторних инфекција. Процене СЗО показују да је 40-80% ДЕНГ инфекција асимптоматско [3].

Типичне клиничке манифестације укључују:

-Акутна грозница (траје 2-7 дана, може бити двофазна)

- Јака главобоља и ретроорбитални бол (бол иза очију)

- Бол у мишићима и зглобовима (обично се назива „грозница прелома костију“)

- Макуларни или макулопапуларни осип

- Благе хеморагичне манифестације (нпр. екхимоза, епистакса, крварење десни)

Симптоматска денга се обично дели на три различите фазе: фебрилну фазу, критичну фазу и фазу опоравка. Приближно мање од 5% симптоматских пацијената напредује до тешке денге. Због недостатка специфичних клиничких карактеристика, дијагноза заснована искључиво на клиничким симптомима је тешка, што повећава ризик од погрешне дијагнозе и недовољне дијагнозе. СЗО експлицитно наглашава да сама клиничка дијагноза није довољна да би се осигурала тачност, што чини лабораторијску потврду неопходном [1].

 3 кључне тачке из документа СЗО „Лабораторијско тестирање на вирус денге: Привремене смернице, април 2025. године“

У априлу 2025. године, Светска здравствена организација је објавила ажуриране привремене смернице о лабораторијском тестирању за денга грозницу (DENV), пружајући ауторитативне техничке смернице за глобалну дијагнозу денге. Ове смернице синтетишу најновије доказе о лабораторијском тестирању денге у контексту текуће глобалне ванредне ситуације са денгом и нуде практичне препоруке прилагођене условима са различитим нивоима ресурса.

3.1 Основни принципи стратегије тестирања

У смерницама се наглашава да дијагноза денге мора усвојити комбиновану стратегију тестирања са више маркера на основу стадијума болести [1]. С обзиром на одсуство универзалног дијагностичког алгоритма, стратегије тестирања треба прилагодити локалним епидемиолошким контекстима, узимајући у обзир следеће кључне факторе [1]:

-Стадиј инфекције: Број дана након појаве симптома одређује најприкладнију методу тестирања

-Врста узорка: Погодност пуне крви, плазме или серума за детекцију DENV-а

-Регионална епидемиологија: Локално циркулишући серотипови DENV-а и ко-циркулација других арбовируса

-Ризик од коинфекције: У регионима са преклапајућом циркулацијом арбовируса, требало би размотрити мултиплекс тестирање како би се разликовали различити патогени

3.2 Стратегија тестирања заснована на фазама

Према смерницама СЗО, лабораторијско тестирање денге треба да прати јасне временске оквире на основу стадијума болести [1,2]:

(1) Тестирање акутне фазе (≤7 дана након почетка)

-Тестирање нуклеинских киселина (молекуларно тестирање): Реверзна транскрипција-полимеразна ланчана реакција (RT-PCR) и друге молекуларне методе детектују DENV РНК са високом осетљивошћу.

-Тестирање антигена: Детекција NS1 антигена, који постаје детектован у року од 1-3 дана након појаве болести.

Током акутне фазе, нивои виремије су релативно високи, а тестирање нуклеинских киселина и антигена постиже оптималну осетљивост.

(2) Тестирање у фази опоравка (≥4 дана након почетка)

-Серолошко тестирање: ИгМ антитела обично постају детектована око 4. дана након почетка болести.

У већини случајева, IgM антитела перзистирају 14-20 дана, а у неким случајевима, перзистирање може трајати и до 90 дана.

-Тестирање IgG има ограничену вредност за дијагнозу акутне денге грознице због потенцијалних унакрсних антитела од претходне инфекције флавивирусом или вакцинације.

(3) Алгоритам за дијагностику сумњивих случајева

Смернице укључују дијагностички алгоритам за сумњиве случајеве денге, препоручујући одговарајуће методе тестирања на основу дана након појаве симптома: тестирање NS1 антигена и тестирање нуклеинских киселина су примарни приступи у раној фази, док је серолошко тестирање примарна метода у каснијој фази.

3.3 Процена и избор перформанси методе испитивања

Према СЗО, систематска евалуација учинка и применљивих сценарија различитих тестирања на денгу су следећи:

4 Препоруке за производе за макро и микротестирање денге по сценарију

Да би подржао превенцију и контролу денге, Macro & Micro-Test пружа интегрисани дијагностички портфолио који обухвата брзи скрининг, молекуларну потврду и геномски надзор, задовољавајући потребе у различитим фазама управљања епидемијом.

4.1 Сценарио 1: Брзи скрининг и циљани надзор

Применљиво у клиникама за грозницу, установама примарне здравствене заштите, скринингу заједнице током епидемије и карантину у луци/на граници.

-Брзи тест за антиген вируса денге NS1: Детекција ране инфекције (1-3 дана након почетка) са резултатима за 15 минута за брзу тријажу.

-Тест антитела IgM/IgG на вирус денге: Разликује примарне/секундарне инфекције ради процене ризика од тешке болести.

- Комбиновани брзи тест за антиген NS1 вируса денге + IgM/IgG: Истовремено детектује антиген и антитела за комплетну дијагнозу.

-Тест антитела IgM/IgG против вируса чикунгуње: Омогућава диференцијалну дијагнозу са денга грозницом ради прецизне идентификације патогена.

4.2 Сценарио 2: Прецизна дијагноза и реаговање у ванредним ситуацијама

-Комплет за детекцију нуклеинских киселина вируса денге I/II/III/IV: Детекција и диференцијација 4 серотипа (граница детекције 500 копија/мл) за праћење епидемије.

-Лиофилизовани ПЦР комплет за вирус денге: Преносив на собној температури, погодан за подручја са ограниченим ресурсима и изненадне епидемије.

-Мултиплекс PCR комплет у реалном времену за денгу/зику/чикунгуњу: Истовремено детектује 3 арбовируса за ефикасну диференцијалну дијагнозу код сложених епидемија.

Сви горе наведени реагенси су компатибилни са потпуно аутоматизованим системом за анализу узорка и одговора AIO 800, смањујући ручни рад и унакрсну контаминацију, и побољшавајући ефикасност и биолошку безбедност.

4.3 Сценарио 3: Геномски надзор и анализа вирусне лозе

Применљиво на националне референтне лабораторије, истраживачке институције јавног здравља, у складу са позиционирањем СЗО у вези са НГС-ом.

Решења за геномски надзор компаније Macro & Micro-Test подржавају секвенцирање целог генома ради праћења вируса, разјашњења ланца преноса, праћења варијанти и прилагођавања стратегије вакцинације. Она подржавају ручне/аутоматизоване токове рада, побољшавајући пропусност и репродуктивност, омогућавајући лабораторијама да пређу са рутинског тестирања на напредни надзор, у складу са нагласком СЗО на јачању праћења еволуције вируса.

4.4 Вредност интегрисаних решења

Макро и микро-тест пружа комплетна дијагностичка решења за откривање арбовируса, подржавајући сваку фазу управљања епидемијама: алате за брзи скрининг за здравствене установе на првој линији фронта, молекуларну потврду за прецизну дијагнозу и могућности анализе целог генома за епидемиолошки надзор. Са високо ефикасним тестовима, флексибилним токовима рада и платформама спремним за аутоматизацију, ова решења оснажују лабораторије и системе јавног здравља да ојачају спремност и одговор на нове арбовирусне претње широм света.

Референце

[1] Светска здравствена организација. Лабораторијско тестирање на вирус денге: Привремене смернице, април 2025. Женева: Светска здравствена организација; 2025.

[2] Техничка саветодавна група СЗО за глобалну иницијативу за арбовирус. Јачање глобалне спремности и одговора на претње арбовирусних болести: Позив на акцију. Lancet Infect Dis. 2026;26(1):15-17.

[3] Ланцетов микроб. Превазилажење дилеме дијагностике денге. Ланцетов микроб. 2025;6(7):101190.